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選擇DNA提取試劑盒時,重要的變量可能是你所使用的生物體

點擊次數(shù):1789 更新時間:2022-03-18
  實驗室工作中,經(jīng)常會需要用到純化的DNA,這時我們通常需要使用一個DNA提取試劑盒對目的DNA進行分離純化。市面上有很多類型的提取試劑盒,當使用不太熟悉的樣本類型時,選擇合適的盒子是尤為關(guān)鍵的。
 

 

  DNA提取試劑盒組分:
  目前大多數(shù)DNA提取試劑盒遵循相同的基本步驟:裂解,柱純化,洗滌雜質(zhì),柱洗脫。然而,不同的盒子在完成每個步驟的方式上有很大的不同。
 
  使用的樣本類型:
  不同的DNA來源有不同的試劑盒,從實驗室培養(yǎng)的細胞,到臨床樣本,土壤樣本,甚至指紋,也有許多專門用于某些應用的試劑盒。例如,土壤中的腐殖酸或血液中的血紅蛋白會污染純化的DNA,從而干擾下游的DNA實驗。當然,也有一些試劑盒會在進行純化步驟之前專門去除這些組分。如果想從PCR或瓊脂糖凝膠中純化DNA,有許多方法可以提高瓊脂糖凝膠純化的回收率。
 
  在選擇DNA提取試劑盒時,重要的變量可能是你所使用的生物體。
  1、細菌:許多試劑盒都有用于細菌DNA分離的不同成分,這些試劑盒之間的主要區(qū)別在于細胞是如何被分解的,因為有些細菌比其他細菌更更有挑戰(zhàn)性。例如,形成生物膜的細菌可能比傳統(tǒng)的基于去垢劑的方法需要更強的裂解技術(shù)。
  2、動物組織:用于動物組織DNA分離的試劑盒通常具有更溫和的裂解技術(shù),因為大多數(shù)動物細胞不像細菌細胞那樣有細胞壁。然而,動物組織DNA提取的挑戰(zhàn)往往在于選擇合適的組織勻漿方法。此外,許多動物DNA純化試劑盒不使用苯酚/氯仿萃取或乙醇作為沉淀步驟,以減少破壞DNA的風險。
  3、植物:當涉及到植物DNA分離時,必須考慮到其他一些因素,需要注意污染物的去除。植物在純化過程中通常含有未分離的糖,因此,洗滌劑選擇性地與DNA結(jié)合并從溶液中析出,通常是先將洗滌劑溶解在高濃度的鹽溶液中,然后提取DNA。
  4、血液:由于技術(shù)上的許多最新進展,血液DNA分離試劑盒中有多種裂解技術(shù)和提取方法可供選擇。從血液中分離出的DNA將在很大程度上決定你使用的裂解和提取的類型。無論應用是什么,一定要選擇一種能夠提供純凈、完整、雙鏈和濃縮DNA的試劑盒,以獲得最佳效果。
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